分光光度计标准曲线法测定化合物的含量
发布日期:2017-11-17 点击次数:
关键词:分光光度计;标准曲线;美析仪器www.macylab.com;UV-1100;UV-1200
紫外可见分光光度计进行定量分析时,可将待测试样的纯品配制成一系列标准溶液,事先绘制标准曲线,由待测未知样品的吸光度对照标准曲线,就可得到其含量。美析仪器www.macylab.com
例如,复方阿司匹林(A.P.C)含有三种组分:阿司匹林A、非那西丁(P)、咖啡因(C),阿司匹林和咖啡因的最大吸收峰在277nm和275nm,较为接近,必须事先分离,而咖啡因和非那西丁的最大吸收峰相距较远,可用联立方程解之。将待分析的药片粉碎并溶于氯仿中,用4%碳酸钠水溶液萃取两次,用蒸馏水洗涤一次,合并水层。则阿司匹林进入水层,非那西丁和咖啡因留在氯仿中。再用氯仿洗涤水层三次,进一步提取水层中残留的非那西丁和咖啡因。合并氯仿层,并过滤到250ml+容量瓶中,用氯仿稀释至刻度。最后,移取ImL此液到lOOmL容量瓶中,用氯仿稀释到刻度。取此液在250nm和275nm处测定吸光度,分别为O.795和O.280。水层用稀酸酸化(pH=2),用氯仿萃取后,将萃取液转入lOOmL容量瓶,用氯仿稀释至刻度,在277nm处测其吸光度为O.78。配制的已知浓度的样品,可求出lOOmL/L的阿司匹林在277nm处测的吸光度为O.72,可知待测样品中的阿司匹林的含量为1OOX O.78/O.72 =108mg/L,也就是10. 8mg/lOOmL;即药片含阿司匹林10. 8g。对标准的非那西丁溶液,测得其比吸光系数为K250=O。0767L/(mg.cm),K275=O.0200L/(mg,cm)。对标准的咖啡因溶液,测得其比吸光系数为K250=O.0177L/(mg.cm);K275 = O.0518L/(mg . cm)。由此可得出联立方程,求得咖啡因浓度为1. 55mg/L。即O.155mg/lOOmL非那西丁浓度为10. Img/L。由于未知溶液稀释了259倍,所以药片中含非那西丁的含量为1. 01 X 250 = 252mg,含咖啡因的量为O.155X 250= 38. 8mg。同样,甲苯酚中的甲基和羧基因为位置不同,有邻、间、对三种异构体,它们有各自不同的吸收带,可分别在波长为277nm、273nm、268nm处测定吸光度值,解联立方程,即可算出各自组分的含量。
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