磺胺类药物的血药浓度测定及药动学参数的应用方案（比色法）
磺胺类药物的血药浓度测定及药动学参数的应用方案（比色法）
原理
磺胺类药物及苯环上有游离氨基的化合物在酸性溶液中与亚硝酸钠进行重氮化反应，生成重氮盐，此外在碱性溶液中与酚类物质(如麝香草酚)发生偶联反应，生成橙红色偶氮化合物，可在560 nm波长下进行比色测定磺胺嘧啶的浓度。
仪器与材料
家兔
肝素 磺胺嘧啶钠 三氯醋酸 亚硝酸钠 盐酸 戊巴比妥钠 麝香草酚 肝素 生理盐水
试管 离心管 注射器 吸管 离心机
步骤
麻醉并固定：
取健康家兔一只，称重，3%戊巴比妥钠1 ml /kg，耳缘静脉麻醉，麻醉后，仰卧位固定在兔台上。
手术：
纵向切开颈部正中皮肤，分离颈下组织，找到气管，在气管一侧分离出颈总动脉，从颈总动脉下穿两线待用。由耳缘静脉注射肝素钠1 ml /kg，结扎远心端，近心端用动脉夹夹住，两端之间留2 cm 距离，用眼科剪在远心端朝近心端方向呈45 度角剪小口，然后从向心方向插入塑料管，推进1～2 cm结扎并固定，塑料管用止血钳夹住，松开动脉夹。
取空白血：
取1 ml，置于干燥的含肝素的试管中，振摇。
给药取血：
从耳缘静脉注射20％磺胺嘧啶钠溶液（1.0 ml/kg），给药后2. 5. 10. 20和30 分钟分别取血1 ml，置于干燥的含肝素的试管中，振摇。
去蛋白：从每份血样中分别取血0.2 ml 置于离心管中，加入5％三氯醋酸4.6 ml充分振摇后放置数分钟，然后放入离心机内离心，使血中蛋白质沉淀完全。
重氮化及偶合化：取上清液1.5 ml依次加入2N盐酸0.25 ml和5％亚硝酸钠0.3 ml，充分振摇后再加入麝香草酚0.3 ml振摇后呈橙红色。
测定：
将上清液倒入比色皿中内，放入分光光度计内，以给药前血样作空白对照，于560 nm波长处进行比色测定，记录其光密度值。
制作标准曲线
将给药后将不同时间的光密度输入计算器，计算出不同时间酚红的血浆浓度。以浓度为横坐标，以光密度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程。以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线，
该直线的方程式为logCt=lgCO-k/2.303·t
药物血浆半衰期T1/2=0.693/k(单位：h或min)
采用直线回归的运算程序，计算出不同时间酚红的血浆浓度。
注意事项
1. 分离颈总动脉时，要把神经分离开，结扎的时候不能结扎神经。
2. 用取液器取上清液的时候，小心谨慎，不要取出血。
3. 离心时应将取血试管重量平衡后对称置入。
4. 禁止用手接触比色皿的透光面，若有液体，用擦镜纸擦拭干净。
仪器参数
关于我们
上海美析仪器公司简介
上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技——因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。
美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软件开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将陆续推出一批全新的分析类仪器。
美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户同时，20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。
（美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了CE认证、FCC认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等）
