火焰石墨炉原子吸收分光光度法测定顺铂的含量
发布日期:2017-09-19 点击次数:
关键词:原子吸收分光光度法;火焰法;石墨炉法;美析www.macylab.com;
建立测定血浆中顺铂含量的方法。方法:将血浆在1000r/min离心10min后,取上清液,采用石墨炉原子吸收分光光度法测定顺铂的含量。结果:人血浆中顺铂的回收率为94.7%~103.70%。结论:该方法为一种可信度较高、操作性较强的血浆顺铂的测定方法。
顺铂(CDDP)是一种铂的金属络合物,是20世纪70年代上市的一种临床有高度抗癌活性的药物,在临床上已得到广泛的应用。大剂量顺铂为主的联合化疗,对于手术、放疗或化疗后复发和转移的患者有较好的疗效,但其严重的肾毒性反应,限制了该药的使用。因此,测定血浆中铂的浓度很有必要,可为临床合理用药提供理论依据。用石墨炉原子吸收分光光度法测定生物样品中铂的浓度,相对高效液相色谱法(HPLC法)、电镜法,其方法特异性高,准确,迅速,简便。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器 AA-1800H原子吸收分光光度计,空心阴极灯,热解涂层石墨管(美析公司) ,微量进样器,高速离心机.
1. 2 试剂 顺铂(齐鲁制药厂)、非离子性界面活性剂Triton X-100、血浆、钢瓶纯氩(含量>99.99% )
2 方法与结果
2. 1 测试条件 选用石墨炉原子吸收分光光度计,工作电流15mA,波长265.9nm,狭缝0.4nm,载气为氩气,流量200mL/min,间断载气流量30mL/min,检测信号(P/H)峰高,手动进样,进样量为10μL。
2. 2 石墨炉升温程序
2. 3 标准曲线的绘制 取顺铂,加纯化水溶解,分别配制成20.0, 10.0, 2.0, 1.0, 0.4μg/mL,依次用血浆1 ∶1稀释,即得顺铂标准溶液。每个标准点测3次,取平均值作曲线,结果表明,在测定范围0.2~10.0μg/mL,线性关系良好,回归方程为Y=0.0476X + 0.00715, r=0.9999。
2. 4 样品处理 取血浆3mL于肝素化的离心管中,取腹腔积液3mL于离心管中, 1000 r/min离心10min,取上清液用0.25% TritonX2-00溶液按1 ∶1稀释,振摇均匀后进样测定。
2. 5 回收率实验 取不含铂血浆,定量加入顺铂,按上述条件测定,其回收率.
3 讨论
在顺铂的原子吸收测定中,使用二步升温干燥样品和三步升温使样品灰化,以防溅和损失,同时采用灵敏度高的热解涂层石墨管,使测定中灵敏度和重现性都有一定改善。
顺铂可采用腹腔注射给药方式,可同时采集腹腔积液辅助观察疗效。一般腹腔积液中顺铂浓度越高,血浆中浓度越低,则说明局部吸收多,对肾脏、骨髓的不良反应小,疗效越好。顺铂在体内消除十分缓慢,几乎所有患者均发生肾毒性。因此,建立铂含量测定十分必要,其检测方法有HPLC、电镜等,也有用原子吸收分光光度计来检测。但以原子吸收分光光度计法测定优点最多,适用临床药物浓度检测。
顺铂(CDDP)是一种铂的金属络合物,是20世纪70年代上市的一种临床有高度抗癌活性的药物,在临床上已得到广泛的应用。大剂量顺铂为主的联合化疗,对于手术、放疗或化疗后复发和转移的患者有较好的疗效,但其严重的肾毒性反应,限制了该药的使用。因此,测定血浆中铂的浓度很有必要,可为临床合理用药提供理论依据。用石墨炉原子吸收分光光度法测定生物样品中铂的浓度,相对高效液相色谱法(HPLC法)、电镜法,其方法特异性高,准确,迅速,简便。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器 AA-1800H原子吸收分光光度计,空心阴极灯,热解涂层石墨管(美析公司) ,微量进样器,高速离心机.
1. 2 试剂 顺铂(齐鲁制药厂)、非离子性界面活性剂Triton X-100、血浆、钢瓶纯氩(含量>99.99% )
2 方法与结果
2. 1 测试条件 选用石墨炉原子吸收分光光度计,工作电流15mA,波长265.9nm,狭缝0.4nm,载气为氩气,流量200mL/min,间断载气流量30mL/min,检测信号(P/H)峰高,手动进样,进样量为10μL。
2. 2 石墨炉升温程序
2. 3 标准曲线的绘制 取顺铂,加纯化水溶解,分别配制成20.0, 10.0, 2.0, 1.0, 0.4μg/mL,依次用血浆1 ∶1稀释,即得顺铂标准溶液。每个标准点测3次,取平均值作曲线,结果表明,在测定范围0.2~10.0μg/mL,线性关系良好,回归方程为Y=0.0476X + 0.00715, r=0.9999。
2. 4 样品处理 取血浆3mL于肝素化的离心管中,取腹腔积液3mL于离心管中, 1000 r/min离心10min,取上清液用0.25% TritonX2-00溶液按1 ∶1稀释,振摇均匀后进样测定。
2. 5 回收率实验 取不含铂血浆,定量加入顺铂,按上述条件测定,其回收率.
3 讨论
在顺铂的原子吸收测定中,使用二步升温干燥样品和三步升温使样品灰化,以防溅和损失,同时采用灵敏度高的热解涂层石墨管,使测定中灵敏度和重现性都有一定改善。
顺铂可采用腹腔注射给药方式,可同时采集腹腔积液辅助观察疗效。一般腹腔积液中顺铂浓度越高,血浆中浓度越低,则说明局部吸收多,对肾脏、骨髓的不良反应小,疗效越好。顺铂在体内消除十分缓慢,几乎所有患者均发生肾毒性。因此,建立铂含量测定十分必要,其检测方法有HPLC、电镜等,也有用原子吸收分光光度计来检测。但以原子吸收分光光度计法测定优点最多,适用临床药物浓度检测。
关键词:原子吸收分光光度法;火焰法;石墨炉法;美析www.macylab.com;