分光光度法农药残留中磷含量的测定

关键词：  农药残留；蔬菜；分光光度法；磷；美析仪器www.macylab.com; V-1300

摘要：本实验利用了分光光度法，测定五种蔬菜中磷总含量。将试样中的有机物破坏，使磷游出来，在酸性溶液中，用矾钼酸铵处理，在波长660nm下进行测定。实验结果显示，五种蔬菜中总磷在0～4.7949ug/g范围，这五种样品之间辣子中磷的含量最多，香菜中磷的含量最少。

前言：蔬菜与人们的日常生活密切相关，随着生活水平的提高,人们开始关注蔬菜的质量问题，其中农药残留问题也早已成为人们关注的焦点 。由于有机磷农药对于防治蔬菜等的农作物病虫害具有经济、高效、方便等特点，所以有机磷农药长期在农药中占有重要地位^[10]但不少有机磷农药在杀灭病虫害的同时对人体也具有高毒性。随着人们对有机磷农药及其残留的认识，对它进行检测的各种方法也就应运而生。

随着农药品种日益增多，使用范围不断拓宽，加之人们对害物综合治理不够重视而导致农药的不合理不科学使用，农药的管理不规范不严格，最终也危及到人类健康和生态平衡。农药残留给食品带来的影响己受到普遍重视。

各地在防治病虫害中,大量使用化学农药。由于大量持续的使用化学农药,使得蔬菜病虫对化学农药产生抗药性,所以只能加大农药的使用量,农药使用和依赖程度呈现出恶性循环。农药的大量使用,使得蔬菜中农药残留量超标问题突出。 

Indeed, feeling easily fatigued, weak and having a decreased attention span can be symptoms of mild phosphate deficiency.事实上，人体内70-80%的磷沉积于骨骼中,其余大部份构成软组织成分,只有一小部分存在于体液中.血液中的磷以无机磷或有机磷两种形式存在,磷在体内的生理功能主要是参与糖,脂类及氨基酸的代谢,转运能量,调节酸碱平衡,并参与骨骼和牙齿的组成.。磷的含量增高,钙,镁的含量就降低，会引起低血钙症，从而导致神经兴奋性增强。含磷过高,钙,磷比失调时易患佝偻病,降低肌体免疫功能。将导致高磷血症,因体内过高的磷会造成钙质的流失, 以骨质疏松易碎、牙齿蛀蚀、各种钙缺乏症状日益明显、精神不振甚至崩溃，破坏其他矿物质平衡等方面表现。

1.实验部分

1.1  实验样品：菠菜，辣子，青菜，香菜，白菜

1.2实验试剂与仪器

1.2.1试剂

浓硝酸、盐酸、2%抗坏血酸、SnCl₂、盐酸-钼酸铵、磷酸二氢钾 。

1.2.2实验仪器

V-1300型可见分光光度计、电子天平、烘干箱、酸度计、甘汞电极、高温电热炉。

1.3 实验方法

1.3.1样品采集 

从学校的市场买蔬菜作为采集材料。采集好的样品洗了以后进行干燥，然后装入密封袋，贴好标签。

1.3.2样品消解法的选择 

    样品消解的方法有两种，湿法和干法。由于湿法消化耗时长，而且容易造成严重的环境污染。干法试剂用量少，产生的空白值较小，操作简单，管理方便，适宜于大批量样品的分析测定。干法的优点还有试样量可以很大，且试剂的污染可以被减少到最低程度，而这却是湿法消化中所存在的严重题。

1.3.3干法处理   

把样品装到纸袋子里，放烘干箱2天，用研钵把样品完全粉碎，称取样品3g于坩埚中（准确至0.0002g），在电炉上低温炭化至无烟为止，再将其放入高温炉于（550℃±20℃）下灼烧3h，取出冷却，在坩埚中加入1:1盐酸溶液10ml和浓硝酸数滴，小心煮沸约10min，将此溶液转入100ml容量瓶中，并用热蒸馏水洗涤坩埚及漏斗中过滤，冷却至室温后定容，摇匀，为试样分解液，待测。

1.3.4测定方法：分光光度法

1.3.5磷标准溶液的配制

磷标准溶液(P₂O₅，1.0mg/ml)。标准称取在105℃干燥2小时的磷酸二氢钾1.9175克，置于1000毫升容量瓶中，用水溶解稀至刻度，摇匀。

磷标准溶液(P₂O₅，1.0mg/ml)　用移液管准确取含P₂O₅，1.0mg/ml的磷标准液10.0毫升于100毫升容量瓶中,稀至刻度、摇匀。

2 .结果与分析

2.1最大吸收波长的选择

 

（表1）最大吸收波长的选择

 

 

 

最大吸收波长的选择（图1）        

2.2标准曲线的绘制

用吸量管分别吸取20ppm P₂O₅标准溶液 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 毫升，置于5个25ml 比色管或容量瓶中，各加入5ml 蒸馏水，5滴2%抗坏血酸和2.5盐酸-钼酸铵（保持整个溶液体积在15ml以下），放置5分钟后加入7滴0.5% SnCl₂  稀释到刻度，摇勺，放置10min 后用1cm 比色皿在入=660nm 以蒸馏水做空白下，测其吸光度，绘制工作曲线。

表2 磷标准溶液的浓度及吸光度

 

 

磷标准液的标准曲线（图2）

 

我们更清楚的表示浓度和吸光度之间的关系，利用磷标准溶液的浓度和吸光度绘制曲线，上面的表格和曲线可以看出，磷标准溶液的浓度越高，吸光度越高，吸光度和浓度的曾加成正比。

3 样品测定

取试样分解液1ml,液中加入5ml蒸馏水，再加入5滴抗坏血酸（2%），再加入2.5ml盐酸-钼酸铵（4%），放5分钟后，再加入3滴SnCl₂ ，放10分钟后，装到分光光度计，波长为660nm下测定吸光度。

 

 

（表3） 白菜的吸光度与磷含量

 

 

（表4）青菜的吸光度与磷含量

 

 

（表5）菠菜的吸光度与磷含量

 

 

（表6）香菜的吸光度与磷含量

 

 

(表7)辣子的吸光度与磷含量

 

   各中蔬菜之间总磷含量比较（图3）

 

图3可见，利用分光光度法和利用计算机数字图像法在检测蔬菜中的磷含量时, 检测精度均可满足需要。检测结果显示五种蔬菜样品中,辣子中的磷的含量多，香菜中磷的含量较少.

4.结论

蔬菜与人们的日常生活密切相关，随着生活水平的提高,人们开始关注蔬菜的质量问题，其中农药残留问题也早已成为人们关注的焦点 。

通过测定试验结果表明在磷的最大吸收波长为660nm，在660nm处对上述的五中样品进行测定。白菜中微量元素磷的含量为4.2702（ug/ml）；青菜中微量元素磷的含量为4.4570g（ug/ml）；菠菜中微量元素磷的含量为3.1884（ug/ml）；香菜中微量元素磷的含量为2.7464（ug/ml）；辣子中微量元素磷的含量为4.7949（ug/ml）.

实验结果表明有些蔬菜的磷的含量高一些，有些蔬菜中少一些，但是日常膳食中的磷不会对人体造成危害，只有过量摄入才能有毒性作用。所以日常生活中要注意调整消费高含量磷的食品和低含量磷的食品。